1. استفاده از فیلترهای آنلاین
فیلتر در خط بین اتوسمپلر و ستون کروماتوگرافی (یا ستون نگهبانی) قرار می گیرد. فیلترهای رایج در خط به فیلترهای فولاد ضد زنگ در خط با فریت قابل تعویض (۰٫۵ میکرومتر یا ۰٫۲ میکرومتر) و PEEK یکبار مصرف تقسیم می شوند. برای فیلترهای آنلاین ساخته شده از مواد مختلف، به طور کلی یک صفحه سیب زمینی با دیافروند کوچکتر از صفحه فریت ستون باید انتخاب شود، تا به طور موثری ذراتی را که ممکن است صفحه فریت ستون کروماتوگرافی را مسدود کنند، رهگیری کند. هنگامی که مشخص شد که فشار ابزار شروع به افزایش می کند، این امکان وجود دارد که فریت فیلتر در خط شروع به مسدود کردن کند و ما باید آن را قبل از اینکه کاملاً مسدود شود به روز کنیم.
فیلترهای در خط درست مانند غشاها عمل می کنند، اما نیازی به هیچ کار اضافی ندارد. پس از گریز از مرکز نمونه، هنوز هم ممکن است که مقدار کمی از ذرات وارد ابزار شوند، و ذرات باقی مانده را می توان توسط فیلتر داخل خط واقع در مقابل ستون کروماتوگرافی رهگیری کرد. علاوه بر این، مزیت فیلتر آنلاین این است که جایگزینی آن ساده و آسان است. به طور کلی تنها ۵ دقیقه طول می کشد تا جایگزین آن شود و می توان آن را برای استفاده دوباره شروع کرد و نیازی به صرف وقت خواندن یا کالیبره کردن ندارد. مزیت دیگر این است که فیلتر در خط نیز می تواند ذرات تولید شده توسط سایش پیری و پاره کردن برخی از قطعات در ابزار را فیلتر کند. من به شدت مدافع است که هر ابزار فاز مایع با فیلتر در خط مجهز شده است. حتی اگر از یک ستون نگهبانی استفاده شود، نصب فیلتر در خط قبل از ستون نگهبانی را نیز توصیه می کنم.
2. استفاده از ستون نگهبانی
ستون نگهبانی یک ستون کروماتوگرافی کوتاه است که در مقابل ستون کروماتوگرافی نصب شده است. به طور کلی ۱ تا ۲ سانتی متر طول دارد، و بسته بندی با بسته بندی ستون مورد استفاده مطابقت دارد و اندازه منفذ فریت مورد استفاده بزرگتر از فریت مورد استفاده در ستون نیست. ستون نگهبانی دارای دو عمل است: (۱) می تواند ذراتی را که ممکن است ستون را مسدود کنند مسدود کند؛ (2) از آنجا که ستون نگهبانی و بسته بندی ستون همسان هستند، هر گونه ناهنداره های شیمیایی که ممکن است به طور برگشت ناپذیری با بسته بندی ستون بدون اوج تعامل خواهد شد برای اولین بار توسط ستون گارد اسیر.
استفاده از ستون نگهبانی قطعاً می تواند عمر ستون را گسترش دهد. با این حال، قبل از توجه به اینکه آیا از ستون نگهبانی استفاده کنید، توصیه می شود که نقاط زیر را ارزیابی کنید:
(1) ستون گارد ارزان نیست، بنابراین در نظر بگیرید که آیا هزینه خرید ستون گارد را می توان با افزایش عمر ستون جبران؛
(2) عمر ستون نگهبان چقدر طول می کشد؟ لازم است توجه به زمانی که کارتریج گارد نیاز به تعویض دارد، به طوری که ستون کروماتوگرافی را آلوده نکنیم زیرا جایگزینی خیلی دیر شده است؛
(3) چگونه به برافروختن ستون نگهبان؟ در هنگام برافروختن، ستون نگهبانی و ستون کروماتوگرافی باید به طور جداگانه شسته شوند تا از برافروختن ناهنداری های انباشته شده در ستون نگهبانی به ستون کروماتوگرافی جلوگیری کنند؛
(4) انتظار نداشته باشید برای افزایش بهره وری ستون با توجه به اضافه شدن یک ستون گارد 1-2 سانتی متر. اگرچه نصب ستون نگهبانی مشابه افزایش طول ستون است، اما استفاده از یک ستون نگهبانی نیز دو کانکتور و لوله متصل کننده اضافه می کند که باعث کاهش کارایی ستون سیستم ابزار می شود، بنابراین خوب خواهد بود اگر کارایی ستون بدون ستون نگهبانی حفظ شود.
نیازی به گفتن نیست، استفاده از ستون های نگهبانی قطعا می تواند عمر ستون را گسترش دهد، اما توصیه می شود که هر آزمایشگاه نیاز به ستون های نگهبانی را از نظر اقتصاد و تلاش ارزیابی کند. حتی با یک ستون نگهبانی، توصیه می کنم قرار دادن یک فیلتر در خط بین ستون گارد و autosampler، پس از همه جایگزینی فیلتر در خط ارزان تر از جایگزینی ستون گارد است و زندگی هر دو ستون گارد و ستون را افزایش می دهد.
3- نمونه های درمان نشده را وارد نکنید
با یا بدون پیش درمان، توصیه می شود که تمام نمونه ها قبل از تزریق فیلتر یا سنتریفیوژ شوند. به عنوان مثال، هنگامی که نمونه از طریق یک غشای فیلتر فیلتر می شود تا ذرات را حذف کند و در نتیجه گرفتگی فریت ستون کروماتوگرافیک را کاهش دهد، اندازه منفذ غشای فیلتر باید کوچکتر از اندازه منفذ ستون کروماتوگرافیک باشد. به طور کلی ستون های کروماتوگرافی با ذرات بزرگتر از ۳ میکرومتر از فریت ۲ میکرومتری استفاده می کنند، ستون های کروماتوگرافی با ذرات ۳ میکرومتر از فریت ۰٫۵ میکرومتر استفاده می کنند و ستون هایی با ذرات کوچکتر از ۳ میکرومتر به طور کلی از ۰٫۲ میکرومتر فریت استفاده می کنند، بنابراین فیلترهای عمومی ۰٫۴۵ میکرومتر اساساً می توانند در تمام ستون های کروماتوگرافی به جز ذرات زیر ۲ میکرومتر مورد استفاده قرار گیرند؛ برای ستون هایی که ذرات زیر ۲ میکرومتر دارند، به طور کلی از فیلترهای با منفذ ۰٫۲ میکرومتر استفاده می شود. بیشتر غشاهای فیلتر از پیش بسته بندی شده اند و می توانند مستقیماً به یک سرنگ برای فیلتراسیون متصل شوند یا به عنوان صفحه فیلتر در یک صفحه ۹۶ چاهی مورد استفاده قرار گیرند.